在食品质检实验室，检测员小张发现市售香菇多糖保健品的含量标注存疑；在中药厂QC部门，小王需要验证虫草多糖注射液的质量稳定性。这些场景的共同需求是快速、准确测定多糖含量，而苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法正是解决此类问题的经典方案[1,4,6](@ref)。

苯酚-硫酸法优势在于单次检测可覆盖0.01-0.6mg/ml浓度范围，适合常规质检；而蒽酮-硫酸法灵敏度高达0.03mg/ml，更适用于微量样品检测[2,5,10](@ref)。两种方法均可在普通分光光度计上完成，设备投入成本低。

场景案例：某药企测定黄芪粗多糖含量

1. 样品前处理关键步骤

   取5g黄芪粉末，按1:20料液比沸水回流提取3次，合并提取液后加入Sevage试剂（氯仿:正丁醇=4:1）去除蛋白，离心后乙醇沉淀多糖。注意含果胶样品需先调节pH至3.5，避免形成胶体干扰。

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<li><strong>标准曲线建立要点strong>
    
配制1mg/ml葡萄糖母液，梯度稀释至0-0.6mg/ml。按“样品液1ml+6%苯酚1ml+浓硫酸5ml”显色，沸水浴15分钟后立即冰浴终止反应，490nm测定吸光度[4,6,8](@ref)。曲线R2需≥0.995。


<li><strong>显色反应关键控制strong>
    
某次检测出现异常高值，经排查发现水浴温度波动超过±1℃，导致显色不均。建议使用带振荡功能的恒温水浴锅，确保温度恒定在96℃±0.5℃。

场景案例：某高校实验室测定植物叶片微量多糖

1. 试剂配制特殊要求

   现配0.2%蒽酮硫酸溶液（0.2g蒽酮+100ml浓硫酸），棕色瓶避光保存不超过4小时。某次实验因试剂存放超时导致显色减弱，重复测定RSD达15%[2,9,10](@ref)。

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<li><strong>低温显色控制技巧strong>
    
添加试剂后需立即冰浴降温至4℃，再转入沸水浴10分钟。某研究生因漏掉冰浴步骤，导致显色产物分解，检测值偏低30%[5,9,10](@ref)。


<li><strong>干扰物质排除方案strong>
    
检测含叶绿素的植物样品时，需先用活性炭脱色。某实验室采用0.5g活性炭/100ml提取液，吸附30分钟后过滤，有效消除色素干扰。